• 公司动态NEWS

    您当前的位置:首页 > 公司动态 > ELISA试剂盒优化加样需要注意那些地方?

    ELISA试剂盒优化加样需要注意那些地方?

    发布时间: 2020-06-16  点击次数: 90次
       ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA 、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。

    ELISA试剂盒

      ELISA试剂盒加样的优化:在这一进程中,一般情况下有三次加样,它们分别是加标本,加酶物,加底物。冻住血清融解后,蛋白质部分浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,防止气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上剧烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只需待血清天然凝集、缩短后即可获得。也可在板孔中参与稀释液,再在其参与血清标本,然后在微型颤动器上颤动1分钟以确保混和。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,跨过一星期测定的需低温冰存。
      1、血清:用无菌管搜集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如出现堆积,应再次离心。
      2、尿液:用无菌管搜集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
      3、血浆:应根据标本的要求挑选EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如有堆积构成,应该再次离心。
      4、胸腹水:用无菌管搜集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
      5、脑脊液:用无菌管搜集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
      6、唾液:用无菌管搜集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
      7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管搜集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
      8、牛奶:用无菌管搜集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
      ELISA试剂盒检测过程中的注意事项:
      1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但zui好有专业人员进行矫正。
      2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
      3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
      4、实验时,要使底物避光保存。
      5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
      6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
      7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
      8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
      9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
      10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
      11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
      12、底物是光敏感的,要在临用前现配。
      13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
      14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
      15、待检样品要澄清,否则会影响结果。
      16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
      17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
      18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
      (内容仅供参考,如有问题或遇到问题可咨询我们会竭诚为您服务)
在线客服 联系方式

服务热线

025-52111363