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    ELISA试剂盒实验前样本的处理方法

    发布时间: 2020-05-14  点击次数: 125次
      ELISA试剂盒得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。在采集样品之前必须有一个完整的计划,清楚要测试的成分是否足够稳定。同一回采集的ELISA样本被及时存放在4℃。对于第二天测试的样本,样品应在加载后的-20℃及时冷冻。如果有条件,将它们冷冻到-70℃。标本应避免反复冻融。液体标本:包括血清、血浆、尿液、胸水和腹水、脑脊液、细胞培养上清液等。
     
      1、血清
     
      室温自然凝固10-20分钟后,将血液离心约20分钟(2000-3000转/分)。仔细收集清洗。如果保存过程中出现沉淀,应再次离心。
     
      2、等离子体
     
      应根据样品的要求选用EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂。混合10-20分钟后,离心约20分钟(2000-3000转/分),仔细收集,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
     
      3、尿液
     
      用无菌管收集,离心约20分钟(2000-3000转/分)。仔细收集清洗。如果保存过程中有沉淀形成,应再次离心。根据这一做法,以胸水、胸水和脑脊液(脑脊液)为参考。
     
      4、细胞培养上清
     
      检测分泌成分时,用无菌管收集,离心20分钟(每分钟2000-3000转),仔细收集。
     
      5、培养细胞
     
      检测细胞内组分时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度约为100万/ml。通过反复冻融或添加组织蛋白提取剂,细胞被破坏,细胞内成分释放。离心20分钟(2000-3000转/分)。仔细收集清洗。如果保存过程中有沉淀形成,应再次离心。
     
      6、组织标本
     
      切完标本后,称重。加入一定量的PBS,pH7.4。用液氮快速冷冻。试样熔化后温度保持在2-8℃。加入一定量的PBS(pH7.4)或组织蛋白提取剂,样品用手或匀浆机均匀化。离心20分钟左右(2000-3000 rpm)。仔细收集清洗。一份经过单独加载后将进行测试,其余的将被冷冻并存放。(内容仅供参考,如有问题或遇到问题请在线咨询,我们会竭诚为您服务)
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