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    谈谈ELISA试剂盒的运用过程

    发布时间: 2021-04-21  点击次数: 209次
       elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为29.8mg/L,则认为回收率为99%。
      下面谈谈ELISA试剂盒的运用过程:
      1.ELISA试剂盒用于检测的样品应保持新鲜.
      2.用户在初度运用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底.
      3.每次试验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4.丈量时先用此孔调OD值至零.
      4.要确保微量加样器的确性,能够运用蒸馏水和电子天平进行确定(因为蒸馏水不含杂质,温度环境为20%左右时,lmL的水能够看作是lg 200 L的水能够看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行确定.
      5.因为底物显色剂对光及其灵敏,因此要避光保存.
      6.手艺洗板时每次参加洗涤液后.应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染.甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干.
      7.检测吸光度前应将酶标仪翻开,将其预热30min以上.
      8.底物为TMB,防止与皮肤相触摸.终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性,应尽量防止触摸皮肤.
      9.孵育的时间应该严格依照试剂盒说明书上的时间为准.
      10.对样本的结果有疑问时需要运用其他检测方法进行验证.
      11.没有去离子水或双蒸水时,能够运用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿运用自来水.
      12.在运用微量加样器时,汲取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使汲取标准品溶液.
      13.汲取液体时速度不易太快,以免发生气泡,汲取的量不够准确.
      14.将液体加到酶标孔中时,防止枪头和孔内液体触摸,可使枪头上的液滴和孑L壁触摸,液滴会自然流下去.吸入液体时的方法是吸两档打一档,防止因为枪头的毛细作用使得部分液体不能流出而造成的误差.
      15.汲取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差.
      16.试验前30min将试剂盒中的一切试剂从冰箱取出,使试剂盒中的一切试剂与提取好的样品溶液的温度相同,酶标板只需取出所需量.
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