ELISA试剂盒的基础是抗原或者抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或者抗体任然保持其免疫学活性,酶标记的抗原或者抗体即保留其免疫学活性,又保留了酶的活性,在测定时受检标本(测定其中的抗体或者抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他的物质分开。再加入酶标记的抗原或者抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或者定量分析。由于酶的催化效率很高,间接的放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的灵敏度。ELISA可用于测定抗原,也可以用于测定抗体。
ELSIA试剂盒导致结果过低的因素:
1)样本蛋白含量高低直接影响所测浓度。
2)显色时间过长可能导致OD值整体偏高以致zui高值>2.0,但此亦不影响相对浓度。
3)检查酶标仪紫外光波长是否设置正确,此亦可能导致结果偏离,但不影响相对浓度。
4)仔细检查标准品是否稀释正确,简单的办法是看zui低浓度的那个吸光度值是不是高于说明书的1.5倍,若高,可能有问题。