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    怎样知道ELISA试剂盒的真假?

    发布时间: 2022-04-21  点击次数: 288次
       ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。现在市场上,卖试剂盒的那么多,怎样知道产品的真假?针对此问题做出分析回应,今日教您ELISA试剂盒怎么一辨真假!
      可利用穿插试验即可区分ELISA试剂盒是否造假,办法如下:
      1.取出购买的试剂盒A的包被板两条;
      2.一条包被板加试剂盒A的规范品做规范曲线;
      3.另一条包被板加试剂盒B的规范品做规范曲线;
      4.后续操作依照试剂盒阐明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物;
      5.试验结束后,检测两条规范曲线,假如两条规范曲线共同则阐明两个ELISA试剂盒检测的同一个目标而非A和B,即该试剂盒为伪劣编造ELISA试剂盒。
      6.假如两条规范曲线不共同则阐明两个ELISA试剂盒检测的不同目标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的。
      ELISA试剂盒实验的注意事项:
      一、包被
      1、将包被抗原用包被缓冲液配制包被液,每孔取100 mL加入酶标板,盖好盖板膜,包被条件如下表,4℃ 16-20h包被时酶标板可以叠放,而37℃ 2h包被时酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距,如培养箱从底部产热,则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。
      2、包被加样采取吸二打一的方式,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断,若应加入,则小心振荡使其落入孔底,反之则用吸水纸小心吸出,并注意不可溅出,不可产生气泡。
      3、包被前预吸查看枪头是否合格,水流是否一致,不一致者应更换枪头,包被应采用枪头,每包被一块板,应将枪头套紧,并且在包被的过程中要注意查看吸液是否一致,在包被过程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时淘汰。
      4、若采用37℃ 2h包被模式,则应给酶标板编码,保证每块板子的包被时间一致。
      二、洗板
      1、包被后要进行两次洗涤,250微升/孔,洗涤完毕后,应在毛巾上拍干参与液体,并及时进行下一步封闭。
      2、 洗涤时要注意查看水流是否一致,在洗涤程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时淘汰。
      三、封闭
      1、封闭液应提前一小时取出初步回温,用前摇匀,每孔取180 mL加入酶标板,盖好盖板膜,37℃封闭 1.5h, 酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距,如培养箱从底部产热,则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。
      2、封闭加样采取吸一打一的方式,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断,若应加入,则小心振荡使其落入孔底,反之则用吸水纸小心吸出,残留在枪头内的溶液不要打出 以免产生气泡。并注意不可溅出,不可产生气泡
      3、封闭前预吸查看枪头是否合格,水流是否一致,不一致者应更换枪头,封闭应采用枪头,每封闭一块板,应将枪头套紧,并且在包被的过程中要注意查看吸液是否一致,在封闭过程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时淘汰。
      四烘干装袋
      1、封闭完后,摔倒孔内液体,并在毛巾上拍干,接下来采取烘干或者晾干的方式*干燥酶标板。烘干:37 ℃倒置(不加盖板膜或用自封袋),每5块板烘干30 min,随着板子数量增多时间相应延长,如100块板,需要烘3 h,依次类推;晾干:底部铺一层干净的A4纸或者吸水纸,倒置板子,在顶层铺一层盖住避光,室温晾18-24h。
      2、板子干燥后,应及时装入自封袋,按照每块板1袋干燥剂的量装入,袋子外面写好板子制备日期,放入本成品库冷藏环境保存备用。
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