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怎样知道ELISA试剂盒的真假？
发布时间： 2022-04-21 点击次数： 837次ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来，得到科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。现在市场上，卖试剂盒的那么多，怎样知道产品的真假？针对此问题做出分析回应，今日教您ELISA试剂盒怎么一辨真假！可利用穿插试验即可区分ELISA试剂盒是否造假，办法如下：1.取出购买的试剂盒A的包被板两条；2.一条包被板加试剂盒A的规范品做规范曲线；3.另一条包被板加试剂盒B的规范品做规范曲线；4.后续操作依照试剂盒阐明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物；5.试验结束后，检测两条规范曲线，假如两条规范曲线共同则阐明两个ELISA试剂盒检测的同一个目标而非A和B，即该试剂盒为伪劣编造ELISA试剂盒。6.假如两条规范曲线不共同则阐明两个ELISA试剂盒检测的不同目标，试剂盒A只能检测A，不能检测B，即该试剂盒为正常的。ELISA试剂盒实验的注意事项：一、包被1、将包被抗原用包被缓冲液配制包被液，每孔取100 mL加入酶标板，盖好盖板膜，包被条件如下表，4℃ 16-20h包被时酶标板可以叠放，而37℃ 2h包被时酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距，如培养箱从底部产热，则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。2、包被加样采取吸二打一的方式，应避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断，若应加入，则小心振荡使其落入孔底，反之则用吸水纸小心吸出，并注意不可溅出，不可产生气泡。3、包被前预吸查看枪头是否合格，水流是否一致，不一致者应更换枪头，包被应采用枪头，每包被一块板，应将枪头套紧，并且在包被的过程中要注意查看吸液是否一致，在包被过程中若出现任何小问题，都应将此块板做出记号，以便后期组装入库时淘汰。4、若采用37℃ 2h包被模式，则应给酶标板编码，保证每块板子的包被时间一致。二、洗板1、包被后要进行两次洗涤，250微升/孔，洗涤完毕后，应在毛巾上拍干参与液体，并及时进行下一步封闭。2、 洗涤时要注意查看水流是否一致，在洗涤程中若出现任何小问题，都应将此块板做出记号，以便后期组装入库时淘汰。三、封闭1、封闭液应提前一小时取出初步回温，用前摇匀，每孔取180 mL加入酶标板，盖好盖板膜，37℃封闭 1.5h, 酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距，如培养箱从底部产热，则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。2、封闭加样采取吸一打一的方式，应避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断，若应加入，则小心振荡使其落入孔底，反之则用吸水纸小心吸出，残留在枪头内的溶液不要打出 以免产生气泡。并注意不可溅出，不可产生气泡3、封闭前预吸查看枪头是否合格，水流是否一致，不一致者应更换枪头，封闭应采用枪头，每封闭一块板，应将枪头套紧，并且在包被的过程中要注意查看吸液是否一致，在封闭过程中若出现任何小问题，都应将此块板做出记号，以便后期组装入库时淘汰。四烘干装袋1、封闭完后，摔倒孔内液体，并在毛巾上拍干，接下来采取烘干或者晾干的方式*干燥酶标板。烘干：37 ℃倒置(不加盖板膜或用自封袋)，每5块板烘干30 min，随着板子数量增多时间相应延长，如100块板，需要烘3 h，依次类推；晾干：底部铺一层干净的A4纸或者吸水纸，倒置板子，在顶层铺一层盖住避光，室温晾18-24h。2、板子干燥后，应及时装入自封袋，按照每块板1袋干燥剂的量装入，袋子外面写好板子制备日期，放入本成品库冷藏环境保存备用。
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