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    绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒做标准曲线注意事项

    发布时间: 2020-08-18  点击次数: 30次
       许多试剂检测都涉及到标准曲线的问题,标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败,那么究竟如何绘制或制作标准曲线呢?
      绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意:
      1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
      2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
      3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
      4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
      5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
      6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999.
      注意事项:
      1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
      2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
      3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
      4、请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
      5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
      6、底物请避光保存。
      7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
      8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
      9、本试剂不同批号组分不得混用。
      10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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