• 技术文章ARTICLE

    您当前的位置:首页 > 技术文章 > 影响ELISA试剂盒实验的因素有哪些?

    影响ELISA试剂盒实验的因素有哪些?

    发布时间: 2022-07-20  点击次数: 49次
       ELISA试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗体ELISA检测,自从60-70年代问世以来,得到科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。ELISA试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简洁、无放射性危害的优点,因此多年来广泛应用于各高校、学院和科研机构的试验室中。通过几年的试验调查,得出结论影响ELISA试验的要素有如下三方面:
      一、试剂盒
      1、抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体(或抗原)的效价下降或失活,成果不易判别。再有ELISA试剂盒灵敏度高,对杂质的反响灵敏度也高,试验中空白对照OD值偏高或假阳性;
      2、酶结合物浓度过高,也会导致OD值假性增高。
      二、试验仪器
      1、加样器是否通过校正,酶免测定血清用血量很少,如手工加样器的功能不好,吸取样品不,会使成果忽高忽低;
      2、每次洗板前,应查看洗板机针孔有无阻塞。
      三、ELISA试剂盒操作
      1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后运用,试剂用完及时放回冰箱冷藏,避免形成试验成果假性下降;
      2、加样时留意勿触及包被板底部,避免擦伤包被物使抗体(抗原)掉落而影响试验成果的精确性;
      3、洗刷不充分,会使成果假性增高,过分洗刷呈假阴性;
      4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽,特别是冬天板从37℃水浴箱取出时,底部留有水汽,应将板底擦干后进行比色,水汽或孔内气泡也会使OD值升高;
      5、抗原与抗体反响达到完全平衡,依赖于温度与时刻。温度高于45℃易引起失活及符号物掉落,温度低于4℃,影响反响速度。
      由于ELISA试剂盒试验的影响要素较多,我们在实践工作中必须操作规范、仔细,避免和排除各种要素的影响,使之得到精确可靠的查验成果。
    上一篇:免疫检测的基础知识
    下一篇:没有了
在线客服 联系方式

服务热线

18994069851