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    elisa试剂盒检测中显色液A和B有什么作用

    发布时间: 2021-07-21  点击次数: 82次
       酶联免疫吸附试验(enayme liked immunosorbent,ELISA)是20世纪70年代发展起来的一种检测技术,因其具有敏感性高 特异性强 操作简单等优点,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定,为辅助临床诊断与生物科研起到了积极的作用.
      elisa试剂盒检测中显色液A和B有什么作用
      酶联免疫诊断试剂盒的底物A就是显色剂A(含过氧化氢)为供氢体(DH2),底物B就是显色剂B(含TMB),用于显色.另外,常用的底物还有:
      AP的底物,常用的为对-硝基苯磷酸脂(PNP),其反应物为黄色的对硝基酚,测读波长为405nm2)GOD的底物,为葡萄糖,供氢体为对硝基蓝四氮唑,反应产物为不溶性的蓝色沉淀什么是TMB?TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的 深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团.同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行.
      TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低.
      由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究.需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制.另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作...酶联免疫诊断试剂盒的底物A就是显色剂A(含过氧化氢)为供氢体(DH2),底物B就是显色剂B(含TMB),用于显色.另外,常用的底物还有:1)AP的底物,常用的为对-硝基苯磷酸脂(PNP),其反应物为黄色的对硝基酚,测读波长为405nm2)GOD的底物,为葡萄糖,供氢体为对硝基蓝四氮唑,反应产物为不溶性的蓝色沉淀,什么是TMB?TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的 深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团.同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行.TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低.由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究.需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制.另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作.TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明.TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用.另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在ELISA中应用日趋广泛.酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,zui适吸收波长为405nm.ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用.
      南京卡米洛生物的elisa试剂盒的优点:操作简单 快速 灵敏度高 特异性强 性价比高 样品所需量少
      1.操作简单 快速.所有操作步骤,都有图谱示意,让你简单明了,不必为研究操作步骤而耽搁时间.
      2.灵敏度高. 酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应 ,产生可供观察的显色反应现象.我们的试剂盒实现了在ug ng pg水平上对其进行定量.
      3.特异性强.特异性来自抗体或抗原的选择性.采用国际抗体抗原,保证的试剂盒品质.
      4.性价比高,质量稳定.
      5.样品所需量少.
      以上知识仅供参考希望对您有所帮助哦。
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