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各种ELISA试剂盒配置方法

发布时间： 2020-05-09　　点击次数： 1314次

　　ELISA试剂盒在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。下面南京卡米洛生物的小编为您讲解下各种ELISA试剂盒配置方法汇总如下：(1) ELISA试验停止液(2) ELISA底物缓冲液(3) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液(4)ELISA试验包被缓冲液(5)ELISA试验洗刷缓冲液(6)ELISA试验稀释液（7）规范品稀释液。

　　(1) ELISA试验停止液(2M H2SO4)：
　　蒸馏水178.3ml，逐滴参加浓硫酸(98%)21.7ml。
　　(2) ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
　　0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
　　0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
　　加蒸馏水50ml。
　　(3) ELISA试验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
　　NaHCO3 1.59克
　　NaHCO3 2.93克
　　加蒸馏水至1000ml。
　　(4) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液:
　　TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml
　　底物缓冲液(PH5.5) 10ml
　　0.75%H2O2 32μl
　　(5) ELISA试验洗刷缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M
　　KH2PO4 0.2克
　　Na2HPO4·12H2O 2.9克
　　NaCl 8.0克
　　KCl 0.2克
　　Tween-20 0.05% 0.5ml
　　加蒸馏水至1000ml。
　　(6)规范品稀释液：
　　PBS 1L配方pH7.2-7.4.浓度0.01mol/L：
　　L酸二氢钾(KH2PO4)：0.27g，
　　L酸氢二钠(Na2HPO4)：1.42g，
　　氯化钠(NaCl)：8g，
　　KCl 0.2g，加去离子水约800mL充分拌和溶解，然后参加浓盐酸或许氢氧化钠调pH至7.2-7.4，后定容到1L，浓度为10mmol/L。
　　(7) ELISA试验稀释液：
　　牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
　　加洗刷缓冲液至100ml
　　或以羊血清、兔血清等血清与洗刷液配成5～10%运用。
　　值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。
　　为了保证ELISA试验的准确性，试验操作中参加的缓冲液和各组分一定要准确，将洗刷液参加酶标板中的时候避免参加的试剂混入别的一个酶标孔，谨防交叉污染。

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